一、細胞DNA定量分析系統(tǒng)技術(shù)原理

　　每一個正常的體細胞核內(nèi)均有23對染色體，只有增殖期的細胞才會有染色體的復(fù)制和加倍。但在生理狀態(tài)下，人體絕大多數(shù)的細胞處于靜止期，DNA含量相當恒定。當致癌因素作用于細胞早期，細胞核內(nèi)DNA結(jié)構(gòu)和含量發(fā)生改變，最終發(fā)展為細胞形態(tài)異常和惡性增殖。因此，細胞DNA定量分析系統(tǒng)可通過測量細胞核內(nèi)DNA含量的變化，在形態(tài)改變不明顯前即可檢測出那些病變細胞，實現(xiàn)癌及癌前病變的早期診斷。

　　圖1 細胞DNA含量

　　癌癥是一種染色體疾病，致癌物質(zhì)、罕見的遺傳病癥以及偶發(fā)的有絲分裂錯誤都是通過產(chǎn)生非整倍體引發(fā)腫瘤的，是一個漫長的過程。

　　圖2 腫瘤發(fā)生發(fā)展示意圖

　　非整倍體讓數(shù)以千計的基因和它們編碼的蛋白處于失衡狀態(tài)，為細胞發(fā)展成更嚴重的非整倍體創(chuàng)造了條件。然而，從非整倍體早期發(fā)展成惡性腫瘤需要較長的時間，在這段時間，醫(yī)生可以從容地進行檢查和實施外科手術(shù)。在癌癥早期，還可以通過檢查非整倍體來區(qū)分惡性腫瘤和“相貌雷同”的良性腫瘤。當癌癥進入晚期，檢查與耐藥或轉(zhuǎn)移性相關(guān)的非整倍體，醫(yī)生就可以選擇最適合的治療方案。因此，早期發(fā)現(xiàn)DNA含量異常細胞對于腫瘤的防治具有重要的價值---- P. Duesberg, Chromosomal chaos and cancer, Sci Am 296 (), pp. 52-59.

　　二、全自動DNA定量分析技術(shù)

　　全自動細胞DNA定量分析系統(tǒng)是由麥克奧迪集團**引進加拿大不列顛哥倫比亞腫瘤研究院(BCCA)的腫瘤早期診斷新技術(shù)。該系統(tǒng)通過對細胞核內(nèi)遺傳物質(zhì) (DNA )倍體定量檢測，判斷細胞的生理狀態(tài)和病理改變、檢測癌及癌前病變。

　　圖3 Motic全自動細胞DNA定量分析系統(tǒng)

　　系統(tǒng)特征

　　? 自動化程度高、結(jié)果可靠，可重復(fù)性好;

　　? 克服人工觀察主觀性強、可重復(fù)性差的缺點，大大提高病變檢出率;

　　? 操作簡便、速度快，操作者無需細胞學(xué)診斷經(jīng)驗;

　　? 報告結(jié)果圖形化處理，便于解讀;

　　? 檢測出早于形態(tài)變化的細胞核DNA含量變化的情況。

　　本系統(tǒng)還可通過評價細胞核各參數(shù)改變的程度，對腫瘤預(yù)后進行判斷，指導(dǎo)腫瘤的治療。其操作簡便，敏感性高，是癌及癌前病變篩查的有效工具。可針對包括宮頸脫落細胞在內(nèi)的多種婦科及非婦科臨床細胞學(xué)標本進行檢測。已廣泛應(yīng)用于歐美等發(fā)達國家的臨床診斷，并已獲SFDA認證，是“宮頸癌防治工程”、“中華醫(yī)學(xué)會婦科腫瘤學(xué)分會”、“健康扶貧工程組委會”等優(yōu)秀機構(gòu)進行宮頸癌篩查的指定技術(shù)。

　　三、細胞DNA定量分析技術(shù)在腫瘤早期檢測中的優(yōu)勢

　　圖4 傳統(tǒng)的細胞學(xué)人工在顯微鏡下診斷的特點

　　圖5 細胞DNA定量分析系統(tǒng)診斷優(yōu)勢

　　四、細胞DNA定量分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用價值

　　檢測出早期癌前病變細胞和癌細胞：在細胞惡變過程中，遺傳物質(zhì)(DNA)含量早于細胞形態(tài)發(fā)生改變，80-90%的惡性實體腫瘤內(nèi)存在非整倍體細胞。這種細胞的出現(xiàn)是提示早期惡性病變的重要標志。因此，可通過細胞DNA定量分析系統(tǒng)檢測對細胞DNA進行定量分析發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)早期癌前病變細胞和癌細胞。

　　腫瘤的惡性程度及預(yù)后評估：整倍體腫瘤其預(yù)后通常較非整倍體腫瘤好。

　　指導(dǎo)腫瘤的治療：經(jīng)放、化療治療后，非整倍細胞是否消失直接反映治療的效果好壞。

　　提高細胞學(xué)檢測工作效率：僅需對約10%的可疑或陽性病例進行復(fù)核，減輕醫(yī)生勞動強度。

　　五、主要用途

　　(1) 用于婦科宮頸癌篩查;

　　(2) 用于非婦科的其他脫落細胞學(xué)的癌及癌前病變檢測

　　(3) 更廣泛的臨床應(yīng)用：

　　1) 表面刮取標本片：例如陰道、宮頸、口腔、肛管、鼻咽部、眼結(jié)膜、體表病灶潰面等處。

　　2) 分泌物或排泄物標本片：例如痰液、尿液、前列腺液、肛腸膿血排泄物、腫瘤之漏管分泌物、乳頭溢液等。

　　3) 在體表或體腔內(nèi)，液體或腫瘤實體的針吸穿刺檢查：例如胸腔、腹腔、四肢、軀干、肺、肝、脾、腎等。

　　4) 內(nèi)窺鏡直視下的刷片及組織印片：例如食管、胃、支氣管、泌尿道、結(jié)腸、直腸等。

　　圖6 細胞DNA定量分析系統(tǒng)的應(yīng)用

　　六、DNA定量細胞學(xué)檢測報告解讀：

　　該技術(shù)敏感性大于95%。液基薄層制片后，可同時做常規(guī)細胞學(xué)診斷，一份標本，兩項檢測。實現(xiàn)優(yōu)勢互補，提高病變檢出率。報告診斷建議明確清晰，易于解讀。

　　(1)正常細胞DNA指數(shù)值(DI)多為1，DNA指數(shù)值大于2.5為異常細胞。

　　(2)臨床建議：

　　a) ≥3個異常細胞或者細胞增殖比例大于細胞總數(shù)的10%，建議進行陰道鏡檢查及活體組織檢查;

　　b) 1-2個異常細胞或細胞增殖比例在5-10%之間，建議4-6個月進行復(fù)查，以便明確原因;

　　c) 無異常細胞，則可定期進行正常篩查(2-3年)。

　　七、DNA定量分析報告

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