特異性診斷是為確定變態反應性疾病者的血清或組織中存在著哪些抗體而作的診斷性測定。變態反應性哮喘的特異性檢查方法有以下六種,但應結合病史等進行綜合診斷。

　　(1)皮膚試驗

　　皮膚試驗是最常用的特異性檢查,包括斑貼、劃痕、挑刺和皮內注射等。臨床上以挑刺和皮內試驗最為常用,如挑刺試驗陰性,可作皮內試驗復查。

　　①方法與原理:特異性患者接觸過敏原后,可誘導產生特異性IgE,此種抗體粘附于皮膚或粘膜下層的肥大細胞表面的IgE受體上,當它與再次進入體內的過敏原相遇形成1個過敏原與2個IgE抗體的橋連,致使肥大細胞內發生一系列生化過程,釋放過敏介質,在皮膚局部產生風團, 紅暈或瘙癢。在患者前臂內側,常規消毒,然后用OT針筒,4號注射針頭吸入不同種過敏原浸液分別注于前臂內側皮內0.02ml,抗原點之間距為2.5cm。皮膚試驗15～20分鐘后,觀察皮膚反應,局部風團及紅暈大小,與對照點相比較。

　　②結果判斷: a.陰性: 無丘疹及紅暈,或非常輕微的紅暈; b.可疑:紅暈小于0.5cm。C.陽性:伴有紅暈的風團0.5;伴有紅暈的風團0.5～1.0cm;伴有紅暈的風團大于1cm 但無偽足;伴有紅暈的風團大于1.5cm,并有偽足。

　　③皮膚試驗應注意的事項: a.囑病人在皮膚試驗前24～48小時,停用抗組織胺藥物及皮質激素,但不必停用喘藥。B.皮膚試驗中,除觀察局部即發反應外,還應注意觀察病人有無胸悶、氣急、面色蒼白、出冷汗、皮膚瘙癢的皮疹等全身反應,一旦發現應及時處理,以免發生危險。C.囑病人回家后,在72小時內繼續觀察有否遲緩反應。D.對可疑過敏原高度敏感者,盡量不作皮內試驗,以免發生意外。

　　(2)放射過敏原吸附試驗

　　放射過敏原吸附試驗,它是特異性過敏原體外測定方法之一,是國外優選的體外診斷方法。它同其他體外測定方法一樣,**的優點是一定安全,可完全避免體內方法可能發生的過敏反應 ,同時不會有使病人致敏或增加病人敏感性的危險,尤其對高度敏感的兒童特應性患者更為適宜。該試驗與支氣管激發試驗的符合率為80%左右,與皮膚試驗的符合率在70%～80%,與白細胞組織胺釋放試驗的相關系數為0.84。該試驗使用離體血清,便于運輸和保存,在方法上敏感性, 特異性和重復性均很高,易于自動化,因此在國外是廣泛應用而僅次于皮膚試驗的測定方法。但該試驗需要的放射性同位素,價格昂貴,半衰期短,操作和處理均需要專門的設備,使其廣泛應用受到一定的限制。

　　①方法與原理:交聯于固相載體的可溶性過敏原與含有對過敏特異性IgE的標本作用,加入同位素標記的抗人IgE,使它再與結合在過敏原上的IgE相作用,用γ計數器測定結合的同位素活性,待測標本中IgE抗體的濃度與測得的同位素活性成正比。

　　②結果判斷:以核素脈沖數大于正常人平均值(需減去臍血放射性計數脈沖數值)3.5倍以上判定為陽性。

　　③激發試驗

　　目前常用的激發試驗有眼結膜、鼻內及支氣管粘膜激發試驗。該試驗是單獨直接判斷支氣管哮喘較為敏感的試驗,其結果與患者過敏史、臨床癥狀和放射性過敏原吸附試驗的結果之間有較好的相關性,在哮喘的病因診斷、臨床療效考核等方面有重要的作用,受到國內外重視。但需要一定的檢測條件及技術,并易引起患者的嚴重發作,故臨床應用上受到限制。

　　①支氣管激發試驗的方法與原理:用各種可疑致敏原浸液讓患者霧化吸入后,觀察有無哮喘的發作,并作肺功能測定,從而判斷患者支氣管對各種特異性致敏原的反應性。

　　②結果判斷:凡試驗中出現哮喘發作,或吸致敏原浸液后,FEV1下降大于15%～25%者為陽性。

　　③激發試驗的注意事項: A.呼吸道感染或肺功能明顯減退者不做該項檢查。B.患者在做試驗前,至少12小時停用β-受體激動劑和磷酸二脂酶遏制劑,24小時前停止用色甘酸鈉,48時前停用抗組織胺藥物,96小時前停用羥嗪類藥物。C.吸入致敏原浸液后至少應觀察30分鐘,有條件者應觀察24小時,便于發現遲緩反應和雙相反應。D.病人感到反應較重時,應及時處理,或及時吸入氣管解痙劑。

　　(4)酶聯免疫吸附試驗

　　酶聯免疫吸附試驗,簡稱ELISA,是特異性過敏原體外測定方法之一。ELISA的特異性和敏感性與放射過敏原吸附試驗相似。它除了有放射過敏原吸附試驗的優點外,而且還有相對廉價、無核素污染，安全和結合物相對穩定的特點。在診斷塵螨過敏中,ELISA和放射過敏原吸附試驗的符合率達95%,ELISA與皮膚試驗的符合率為89.5%。

　　①方法與原理:先將過敏原吸附在聚苯乙烯板或管壁上,當加入的待測血清含有特異性抗體時,抗體便能與相應的過敏原結合,再加入酶標記的抗IgE和相應的底物便可產生一定的顏色反應,用分光光度計測定其光密度,可推知特異性IgE的含量。

　　②結果判斷:以高于正常人光密度平均值一倍定為陽性。

　　(5)白細胞組織胺釋放試驗

　　白細胞組織胺釋放試驗是變態反應主要測定方法之一,白細胞組織胺釋放試驗與皮試、臨床癥狀和特異性IgE之間均有密切關系。一些報告指出,在變態反應性疾病診斷中,以臨床病史為對照,白細胞組織胺釋放試驗為90%。

　　但此試驗有操作復雜、費時、實驗需血量較多、使用血儲存不便的缺點。

　　①白細胞組織胺釋放試驗的方法與原理:由肝素抗凝白細胞分離,加抗原溫育,然后用正丁醇苯和鹽酸反苯提取組織胺，將組織胺與重結晶后的鄰苯二醛縮合,可在熒光分光光度計下測定。

　　②結果測定:組胺釋放率>50%為陽性。

　　(6)人嗜堿性粒細胞脫顆粒試驗

　　該試驗從細胞水平上反映了機體的過敏狀態,為一敏感的體外測定方法。可做為Ⅰ型變態反應性疾病尋找特異性過敏原的有效手段。此試驗雖實驗條件要求簡單,但操作上較為費時,重復性也較其他方法略差。

　　①原理:嗜堿粒細胞胞漿內的顆粒能被堿性染料染成藍色,極易辨認和計數。當加入抗原后, 即與結合在細胞上的IgE產生橋連,導致胞漿內的顆粒脫出,不再被染色,致使染色的細胞明顯減少。

　　②結果判斷:染色細胞減少率>30%定為陽性。